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Western blotting fluorescent

Le Western blotting fluorescent peut offrir de nombreux avantages et améliorer la technique très robuste du Western blotting. Le Western blotting fluorescent est une méthode de plus en plus populaire car elle permet une détection quantitative puissante de l'expression des protéines.

Le principe de base de cette méthode est que la force de la fluorescence d'un fluorophore lié à un anticorps de détection est proportionnelle à la force de l'expression des protéines. Étant donné que la fluorescence ne se produit pas de manière enzymatique, comme c'est le cas avec le Western blotting classique, la quantification est beaucoup plus reproductible. La méthode de détection de l'expression de la protéine est une méthode d'analyse de l'expression.

Figure 1. Westernblotting fluorescent : 1. Le secondaire conjugué à un fluorophore reconnaît l'anticorps primaire lié à la protéine d'intérêt. 2. Une source de lumière est utilisée pour exciter le conjugué fluorescent jusqu'à la fluorescence. 3. Le colorant excité émet une lumière d'une longueur d'onde spécifique, qui peut être visualisée par imagerie numérique. Ainsi, la protéine d'intérêt peut être détectée quantitativement.

Western Blotting fluorescent contre Western Blotting chimiluminescence

Détection par chimioluminescence Détection par fluorescence
Source du signal Signal provenant d'une réaction enzymatique Signal provenant d'un fluorophore
Détection Film photographique, instrument d'imagerie Instrument d'imagerie avec source lumineuse et filtres
Sensibilité Bonne, grande variété de substrats disponibles Bonne, grande variété de fluorophores disponibles
Quantification Simple canal, normalisation difficile Multiples canaux, normalisation plus facile
Durée du signal Minutes à heures Des semaines à des mois

Tampon bloquant pour Western blotting fluorescent

Tampon de blocage pour le Western Blotting fluorescent
  • Conçu pour le western blotting en utilisant des anticorps conjugués à un fluorochrome.
  • Consiste en une formulation protéique exclusive dans une solution saline tamponnée TRIS à pH 7,6 avec du thimérosal.
  • Réactifs ultra purs dissous dans de l'eau de qualité pharmaceutique.
Fluorescent Westernblotting Blocking Buffer ABIN925618
Tampon de blocage pour le Western Blotting fluorescent
  • Le tampon de blocage de Western Blot est idéal pour le Western Blot à l'infrarouge.
  • Ce produit est une solution mère concentrée 2X. Préparer une solution de travail 1X en diluant 1 part de concentré 2X avec 1 part de TBS ou équivalent.
  • Filtré à travers un filtre Millipore de 0,22 micron.
Fluorescent Westernblotting Blocking Buffer ABIN6953293

Kits de Western blotting fluorescents Multiplex Duo

Les kits de Western blotting fluorescents Multiplex Duo sont adaptés à la détection et à la quantification simultanées de populations de protéines spécifiques dans un échantillon biologique. En utilisant une combinaison de deux anticorps sélectionnés pour une réactivité croisée minimale, la méthode de détection fluorescente permet une analyse quantitative simultanée de plusieurs protéines au sein d'un même échantillon sur le même blot.

Figure 2. Kits de Western Blotting Fluorescent Multiplex Duo : Détection simultanée de l'α-tubuline et de la GFP sur un seul blot en utilisant des conjugués d'anticorps secondaires marqués. Le sondage des lysats cellulaires et de la GFP avec des anticorps anti-α-tubuline de souris et anti-GFP de poulet, suivi par des conjugués 649 IgG de chèvre anti-souris (pseudo-couleur vert) et 800 IgG de chèvre anti-poulet (rouge), puis imagé à l'aide du système d'imagerie G:BOX de Syngene a donné lieu à des schémas de détection comparables.

Nom / Lien vers le produit Canaux de fluorescence Réactivité
DyLight™ Multiplex 488/800 Duo Western Blot Kit 488 / 800 nm Souris, lapin
Kit Western Blot DyLight™ Multiplex 549/800 Duo 549 / 800 nm Souris, lapin
Kit Western Blot DyLight™ Multiplex 649/488 Duo 649 / 488 nm Souris, lapin
Kit Western Blot DyLight™ Multiplex 649/549 Duo 649 / 549 nm Souris, lapin
DyLight™ Multiplex 649/800 Duo Western Blot Kit 649 / 800 nm Souris, lapin

Kits Western Blot fluorescents Trio multiplex

Le kit de Western blot multiplex Trio fluorescent est adapté à la détection et à la quantification simultanées de populations de protéines spécifiques dans un échantillon biologique. En utilisant une combinaison de trois anticorps sélectionnés pour une réactivité croisée minimale, la méthode de détection par fluorescence permet une analyse quantitative simultanée de plusieurs protéines au sein d'un même échantillon sur le même blot.

Nom / Lien vers le produit Canaux de fluorescence Réactivité
DyLight™ Multiplex 649/488/800 Trio Western Blot Kit 649 / 488 / 800 nm Poulet, Souris, Lapin
DyLight™ Multiplex 649/549/800 Trio Western Blot Kit 649 / 549 / 800 nm Poulet, Souris, Lapin

Anticorps secondaires conjugués DyLight™

Produit
Reactivity
Clonalité
Application
N° du produit
Quantité
Fiche technique
Reactivity Rabbit
Clonalité Polyclonal
Application WB, FLISA, FM
N° du produit ABIN6699122
Quantité 100 μg
Fiche technique Fiche technique
Reactivity Mouse
Clonalité Polyclonal
Application WB, FLISA, FM
N° du produit ABIN6699038
Quantité 100 μg
Fiche technique Fiche technique
Reactivity Mouse
Clonalité Polyclonal
Application WB, FLISA, FM
N° du produit ABIN6699028
Quantité 100 μg
Fiche technique Fiche technique
Reactivity Rabbit
Clonalité Polyclonal
Application WB, FLISA, FM
N° du produit ABIN6699113
Quantité 100 μg
Fiche technique Fiche technique

Anticorps secondaires conjugués HRP TrueBlot®

Produit
Reactivity
Clonalité
Application
N° du produit
Quantité
Fiche technique
Reactivity Mouse
Clonalité Monoclonal
Application IP, WB
N° du produit ABIN1589977
Quantité 200 μL
Fiche technique Fiche technique
Reactivity Mouse
Clonalité
Application FLISA, FACS, FM, IHC, WB
N° du produit ABIN6698836
Quantité 100 μL
Fiche technique Fiche technique
Reactivity Goat
Clonalité Monoclonal
Application IP, WB
N° du produit ABIN1589970
Quantité 200 μL
Fiche technique Fiche technique
Reactivity Sheep
Clonalité Monoclonal
Application IP, WB
N° du produit ABIN1589972
Quantité 200 μL
Fiche technique Fiche technique
Reactivity Mouse
Clonalité Monoclonal
Application IP, WB
N° du produit ABIN1589968
Quantité 100 μg
Fiche technique Fiche technique

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